ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD:

Al recibirlo y cuando no esté en uso, almacene a 2-8°C. No congelar.

Para asegurar la entrega adecuada del reactivo y la estabilidad del anticuerpo, vuelva a colocar la tapa del dispensador después de cada uso y coloque inmediatamente el dispensador en el refrigerador en posición vertical. Cada dispensador de anticuerpo tiene una fecha de caducidad. Cuando se almacena correctamente, el reactivo es estable hasta la fecha indicada en la etiqueta. No utilice el reactivo más allá de la fecha de caducidad.

CONTROL DE REACTIVOS NEGATIVO:

Además de la tinción con el Ensayo MET (SP44), se debe teñir un segundo portaobjetos con el reactivo de control negativo adecuado.

RENDIMIENTO CLÍNICO:

Estudio LUMINOSITY: NSCLC no escamoso con sobreexpresión de la proteína MET y EGFR de tipo nativo previamente tratado

La eficacia de Emrelist™ (telisotuzumab vedotin-tllv) como monoterapia se evaluó en el estudio LUMINOSITY (NCT03539536), un estudio multicéntrico, abierto y de un solo brazo. Los pacientes elegibles debían tener NSCLC no escamoso localmente avanzado o metastásico con sobreexpresión de la proteína MET y tratamiento con terapia sistémica previa.

La medida principal de eficacia fue la tasa de respuesta objetiva (ORR) según los Criterios de Evaluación de Respuesta en Tumores Sólidos (RECIST) versión 1.1 evaluada por un comité de revisión central independiente cegado (BICR). Una medida de eficacia adicional fue la duración de la respuesta (DOR) por BICR. La población de eficacia primaria incluyó a 84 pacientes (n = 84) con alta expresión de MET de células tumorales con tinción fuerte [3+]).

Tabla 20. Beneficio clínico de la población de pacientes con MET en LUMINOSITY

CDx = Ensayo VENTANA MET (SP44); Cl = Intervalo de confianza; CTA = Ensayo de ensayo clínico.

USO PREVISTO:

El ensayo VENTANA MET (SP44) RXDX ASSAY es un ensayo inmunohistoquímico cualitativo que utiliza el anticuerpo monoclonal de conejo anti-MET, clon SP44, destinado a ser utilizado en la evaluación de la proteína MET en especímenes de cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) no escamoso fijados en formalina e incluidos en parafina (FFPE) mediante microscopía óptica. Este ensayo está diseñado para su uso con el kit de detección OptiView DAB IHC Detection Kit para la tinción en los instrumentos BenchMark ULTRA o BenchMark ULTRA PLUS.

El punto de corte clínico para la expresión de la proteína MET (SP44) RXDX ASSAY de células tumorales que muestren una tinción de membrana y/o citoplasmática fuerte (3+) en NSCLC no escamoso.

El ensayo VENTANA MET (SP44) RXDX está indicado como una ayuda para identificar a pacientes con NSCLC no escamoso que puedan ser elegibles para el tratamiento con Emrelist™ (telisotuzumab vedotin-tllv).

Los resultados del ensayo VENTANA MET (SP44) RXDX deben ser interpretados por un patólogo calificado en conjunto con el examen histológico, la información clínica relevante y los controles adecuados.

Este producto está previsto para su uso en diagnóstico in vitro (IVD).

Figura 1. Tinción de MET con el ensayo VENTANA MET (SP44) RxDx en cáncer de pulmón de células no pequeñas no escamoso.

Consulte la hoja metodológica del kit de detección VENTANA correspondiente para obtener descripciones detalladas de: Principio del procedimiento, Materiales y métodos, Recolección y preparación de especímenes para el análisis, Procedimientos de control de calidad, Solución de problemas, Interpretación de resultados y Limitaciones.

ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES:

1. Para uso en diagnóstico in vitro (IVD).

2. Sólo para uso profesional.

3. No utilizar más allá del número especificado de pruebas.

4. La solución ProClin 300 se utiliza como conservante en este reactivo. Está clasificada como irritante y puede causar sensibilización por contacto con la piel. Tome las precauciones razonables al manipularlo. Evite el contacto de los reactivos con los ojos, la piel y las membranas mucosas. Use ropa y guantes de protección.

5. Los portaobjetos con carga positiva pueden ser susceptibles a estrés ambiental, lo que resulta en una tinción inapropiada. Solicite más información a su representante de Roche sobre cómo utilizar estos tipos de portaobjetos.

6. Los materiales de origen humano o animal deben manipularse como materiales biopeligrosos y eliminarse con las precauciones adecuadas. En caso de exposición, se deben seguir las directivas de salud de las autoridades responsables.

7. Evite el contacto de los reactivos con los ojos y las membranas mucosas. Si los reactivos entran en contacto con áreas sensibles, lávelas con abundante agua.

8. Evite la contaminación microbial de los reactivos, ya que puede causar resultados incorrectos.

9. Para obtener más información sobre el uso de este dispositivo, consulte la Guía del usuario del instrumento BenchMark ULTRA o BenchMark ULTRA PLUS, y las instrucciones de uso de todos los componentes necesarios en navifyportal.roche.com.

10 Consulte a las autoridades locales y/o estatales con respecto al método recomendado de eliminación.

11. El etiquetado de seguridad del producto sigue principalmente la guía GHS de la UE. La ficha de datos de seguridad está disponible para el usuario profesional que la solicite.

12. Para notificar sospechas de incidentes graves relacionados con este dispositivo, comuníquese con el representante local de Roche y con la autoridad competente del Estado miembro o país en el que esté establecido el usuario.

Este producto contiene componentes clasificados de la siguiente manera de acuerdo con el Reglamento (CE) No. 1272/2008:

Tabla 1. Información de peligro

Este producto contiene CAS #55965-84-9, una masa de reacción de: 5-cloro-2-metil-2H-isotiazol-3-ona y 2-metil-2H-isotiazol-3-ona (3:1).

LIMITACIONES ESPECÍFICAS:

Este anticuerpo demuestra las siguientes limitaciones específicas:

1. El ensayo VENTANA MET (SP44) RxDx se ha optimizado en los instrumentos BenchMark ULTRA y BenchMark ULTRA PLUS en combinación con el kit OptiView DAB IHC Detection Kit con un tiempo de incubación del anticuerpo primario de 16 minutos. Los tiempos y temperaturas de incubación distintos de los especificados pueden dar resultados erróneos.

2. La inmunohistoquímica es un proceso diagnóstico de múltiples pasos que requiere capacitación especializada en la selección de los reactivos apropiados, selección de tejidos, fijación, procesamiento, preparación de portaobjetos e interpretación de los resultados de la tinción.

3. La tinción del tejido depende del manejo y procesamiento del tejido antes de la tinción. Una fijación, congelación, descongelación, lavado, secado, calentamiento, corte incorrectos o la contaminación con otros tejidos o fluidos pueden producir artefactos o resultados falsos negativos. Los resultados inconsistentes pueden surgir de variaciones en los métodos de fijación e inclusión.

4. El fijador recomendado es NBF al 10%. Fije las muestras en formalina durante 6–72 horas. La formalina de zinc también es aceptable para un tiempo de fijación de 6–72 horas. Las muestras fijadas en formalina y formalina de zinc por tiempos de fijación menores a 6 horas han demostrado una pérdida de inmunorreactividad específica de MET y pueden conducir a un resultado falso negativo.

5. Los fijadores como AFA, fijador PREFER, Z-fix, formalina alcohólica y etanol al 95% no son aceptables para su uso con este ensayo y han demostrado una pérdida significativa de la inmunorreactividad específica de MET, lo que puede conducir a un resultado falso negativo.

6. Cuando se desconozca el tipo de fijador y/o la duración de la fijación, o estos se encuentren fuera de los parámetros recomendados, y se obtenga un resultado de prueba negativo, considere incluir una declaración en el informe de patología que indique que puede ser necesaria una nueva prueba con una nueva muestra recolectada y preparada de acuerdo con las especificaciones recomendadas del dispositivo.

7. No se han establecido los requisitos de procesamiento de especímenes de citología para el uso de fijadores citológicos como los medios de recolección CytoLyt® y SurePath™. Los especímenes de citología se pueden recolectar y enjuagar en NBF al 10% y los bloques celulares se pueden fijar en NBF al 10%.

8. Las secciones de tejido del paciente deben refrigerarse (5 ºC ± 3 ºC) y teñirse dentro de los 45 días posteriores al corte del bloque de tejido. El almacenamiento fuera de las condiciones recomendadas ha demostrado una pérdida de inmunorreactividad específica de MET y puede conducir a un resultado falso negativo.

9. Para obtener resultados óptimos, se recomienda la consulta con un segundo patólogo con informe sobre el resultado del consenso para los casos puntuados cerca de los puntos de corte de %TC e intensidad de tinción para las indicaciones de diagnóstico complementario.

10. Este ensayo no ha sido validado para su uso con frotis de citología o especímenes descalcificados.

PRINCIPIO DEL PROCEDIMIENTO:

El Ensayo MET (SP44) se une a la proteína MET en secciones de tejido fijado en formalina e incluido en parafina. El anticuerpo específico puede localizarse utilizando un anticuerpo secundario hantenado seguido de un conjugado multímero anti-hapteno-HRP (OptiView DAB IHC Detection Kit, Cat. No. 760-700/06396500001). El complejo específico de anticuerpo-enzima se visualiza luego con un producto de reacción enzimática precipitante. Consulte la hoja metodológica del kit de detección OptiView DAB IHC Detection Kit para obtener más información. Los resultados se interpretan utilizando un microscopio óptico.

Los casos clínicos deben evaluarse con los controles de tejido adecuados. Además de la tinción con el ensayo VENTANA MET (SP44) RXDX, se debe teñir un segundo portaobjetos con el control negativo de Ig monoclonal de conejo (Rabbit Monoclonal Negative Control Ig, Cat. No. 790-4795/06683380001). Este portaobjetos debe ser negativo para tinción específica para ser considerado aceptable.

PROCEDIMIENTO DE TINCIÓN:

Los anticuerpos primarios VENTANA se han desarrollado para su uso en los instrumentos BenchMark ULTRA y BenchMark ULTRA PLUS en combinación con los kits de detección y accesorios VENTANA. Consulte la Tabla 2 para conocer el protocolo de tinción recomendado. Este anticuerpo se ha optimizado para tiempos de incubación específicos, pero el usuario debe verificar los resultados obtenidos con este reactivo.

Tabla 2. Protocolo de tinción recomendado para el Ensayo MET (SP44) con OptiView DAB IHC Detection Kit en instrumentos BenchMark ULTRA y BenchMark ULTRA PLUS.

* Seleccionable por el cliente

Puede realizarse a bordo del instrumento (4-32 minutos, 60 °C) o realizarse fuera de línea (hasta 60 minutos, 60 °C)

RESUMEN Y EXPLICACIÓN:

El ensayo VENTANA MET (SP44) RXDX ASSAY (Ensayo MET [SP44]) es un anticuerpo monoclonal de conejo, clon SP44, producido contra la región carboxilo de la proteína MET humana. Reconoce el protooncogén MET, receptor tirosina quinasa (MET), también conocido como receptor del factor de crecimiento de hepatocitos y a veces abreviado como c-Met.

El Ensayo MET (SP44) demuestra una tinción membranosa y citoplasmática, las cuales se evalúan para la determinación del estado de MET en NSCLC no escamoso.